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小鼠補(bǔ)體蛋白4elisa試劑盒
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品牌:原鑫生物
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小鼠補(bǔ)體蛋白4elisa試劑盒研究錘頭狀核酶通過調(diào)控CD95的表達(dá),對小鼠胰島細(xì)胞凋亡的影響;探索提高胰島移植物存活率的新途徑.方法體外構(gòu)建針對CD95 mRNA 93位點(diǎn)的錘頭狀核酶(pU6-Rz93)和突變型核酶(pU6-dRz93).采用Ⅴ型膠原酶消化法分離小鼠胰島細(xì)胞,通過干擾素-γ(IFN-γ)和白細(xì)胞介素1α(IL-1α)誘導(dǎo)其高表達(dá)CD95后,經(jīng)鈉米載體-Effectene將核酶轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞.通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和免疫印跡檢測(Western blot)法檢測胰島細(xì)胞CD95的表達(dá).胰島細(xì)胞經(jīng)抗CD95的抗體(JO2)作用后,以Caspase-3活性檢測試劑盒檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞Caspase-3活性的變化;MTT法測細(xì)胞的增殖;Annexin-Ⅴ凋亡檢測試劑盒檢測細(xì)胞凋亡,并觀察了各組細(xì)胞對細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL)殺傷的反應(yīng)能力.結(jié)果細(xì)胞因子可誘導(dǎo)小鼠胰島細(xì)胞高表達(dá)CD95分子.轉(zhuǎn)染pU6-Rz93組的胰島細(xì)胞CD95的表達(dá)與轉(zhuǎn)染空載體組和轉(zhuǎn)染pU6-dRz93組相比,明顯下降.經(jīng)JO2處理后,轉(zhuǎn)染pU6-Rz93組胰島細(xì)胞的Caspase-3活性和凋亡率明顯降低,細(xì)胞增殖活性和抵抗CTL殺傷的能力顯著增強(qiáng).結(jié)論針對Fas mRNA 93位點(diǎn)的錘頭狀核酶能顯著抑制小鼠胰島細(xì)胞CD95的表達(dá),使其免于CD95途徑的凋亡;為提高胰島移植物的存活率提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。


小鼠補(bǔ)體蛋白4elisa試劑盒核因子kB受體活化因子配基(RANKL)是誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化, 成熟的重要因子,在生物學(xué)及醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。RANKL主要結(jié)合到破骨前體細(xì)胞的核因子kB活化因子受體(RANK)上,啟動下游NF- kB,P38,ERK,JNK等信號通路,刺激破骨細(xì)胞的分化,成熟及成熟后的破骨細(xì)胞存活。由于RANKL在破骨細(xì)胞的發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用,所以它 的失調(diào)可引發(fā)多種骨骼疾病,如骨質(zhì)疏松,風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。


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